【文献解读】CD40–CD154 相互作用诱导急性高眼压小鼠发生进行性神经变性_北京益仁恒业科技有限公司

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【文献解读】CD40–CD154 相互作用诱导急性高眼压小鼠发生进行性神经变性

发布时间：

2026-10-09

01. 研究背景：

青光眼作为一种神经退行性疾病，主要造成视网膜神经节细胞（RGC）及视神经轴突丢失，进而导致视野缺损与不可逆性失明。高眼压是青光眼最重要的致病因素。然而，临床采用的降眼压治疗并不能完全阻止部分青光眼患者的视野持续损害。这提示，仍需探索眼压升高以外的青光眼发病机制。本研究旨在探讨CD40–CD154 相互作用在急性高眼压诱导的进行性视网膜炎症与损伤中的作用及机制。

阐明 CD40–CD154 相互作用的功能，可进一步揭示眼压恢复正常后视网膜神经变性仍持续进展的机制，并为今后寻找青光眼有效治疗靶点奠定理论基础。

CD154（又称 CD40L）是一种由活化 T 细胞表达的跨膜蛋白。研究证实，在高眼压性青光眼中，CD154 可加速与穆勒细胞共培养的视网膜神经节细胞（RGC）的衰老与凋亡。

CD40主要表达于抗原呈递细胞表面。在缺血/再灌注诱导的视网膜病变模型中，CD40基因敲除（CD40-/-）小鼠的缺血视网膜其炎症反应、神经节细胞丢失及毛细血管变性均显著减轻。

CD40–CD154 相互作用不仅是T细胞活化的共刺激信号，同时也是调控抗原呈递细胞活化的关键因素。既往研究表明，T细胞来源的CD154可通过激活干扰素-γ（IFN-γ）启动动脉粥样硬化进程，进而诱导免疫细胞募集、坏死核心形成及纤维帽变薄。

02. 研究方法：

采用透射电镜观察急性高眼压模型组与假手术组 C57BL/6 小鼠在不同时间点的视神经形态；通过Western blotting检测不同时间点 CD40 与 CD154 的相对表达水平。

分别使用CD40 小干扰 RNA和CD154 小干扰 RNA敲低 CD40、CD154 表达，通过视神经轴突计数与透射电镜成像评估青光眼相关神经损伤。

采用免疫荧光检测 CD154 与 CD40 在小鼠视网膜中的定位；通过流式细胞术检测小鼠脾脏中 CD154、CD40 的表达及CD4⁺ T 细胞亚群分布。

对6～8 周龄小鼠进行急性高眼压（IOP）造模：将30G 针头通过一次性输液管连接至无菌生理盐水袋，将盐水袋抬高约 100 cm，完成造模装置组装。

小鼠经腹腔注射 1% 戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉，予盐酸丙美卡因滴眼液行眼表麻醉；使用复方托吡卡胺散瞳后，将 30G 针头于距角巩膜缘约 1 mm的周边角膜处穿刺进针，避免损伤虹膜、晶状体及针头从角膜穿出。固定针头后打开输液开关，维持高眼压状态 1 小时。假手术组仅行前房穿刺，不升高眼压。拔针后，眼表面涂抹左氧氟沙星眼用凝胶预防感染。

采用大小鼠专用回弹式眼压计Tonolab（Icare Finland Oy，芬兰赫尔辛基），分别于急性高眼压造模前、造模中、造模后测量并记录眼压。此外，分别在造模后第 1、3、7、14 天取视网膜和脾脏，用于后续实验。